雨泽 发表于 2018-4-19 21:50:14

弄个明白!病理切片中的蜡块、白片和HE染色切片分别是怎么个意思嘛

我打算把病理切片借出去做会诊,要不要带冰块什么的?

基因检测公司让借病理切片寄过去,去病理科一问怎么还分好多种啊,蜡块、白片、HE染色,我借的话要借哪种?

……

经常在群里看到大家讨论病理切片相关的话题,很多家人搞不清楚到底什么是蜡块、白片和HE染色。小弟不才,最近也扒拉了一些资料,算是勉强搞清楚了这三者之间的关系,尝试整理篇专题帖,希望能和奇迹网的家人们一起再重新梳理遍,弄明白病理切片中的HE染色、白片和蜡块分别是什么。

一、先说说蜡块

为什么先说蜡块呢,打个不恰当的比方,如果说蜡块是一小块羊肉,那HE染色和白片都是由从这块羊肉上切下来的薄薄的肉片制成的。



真的,在病理科医生圈里,取材室通常被戏称为厨房,锅碗瓢盆刀样样俱全。每天接受来自各科室的标本,而要切的 “肉”,就是患者手术或者穿刺取下来的病变组织。




一般来说,病理诊断中的大标本是指手术切除后获取的标本,小标本则是指通过支气管或穿刺获取的活检标本。

然后严格按照取材要求进行取材,取材完成的标本,需要包埋成蜡块,以便切成片状。



过程大致为:标本——脱水——透明——浸蜡——包埋。


▲ 这个家伙叫做脱水机,可以将病变组织里的水脱掉,这样石蜡才能融进去做标本。


▲ 做蜡块的模子,把病变组织包埋在石蜡中。


▲ 做好的蜡块,尺寸大概为3毫米厚,2厘米长,1厘米宽,为下一步的切片做准备。

嗯,组织被包裹在石蜡中,以蜡块的形式进行保存,后续的病理诊断以及相应检测都需要借助这些蜡块来进行,这就是蜡块啦。

二、再说说白片

蜡块做好了,下面就该切片啦(切片技师的小刀早已饥渴难耐。。)。


白片是指未经染色的石蜡组织切片,使用切片机从蜡块上切下来薄薄的一张蜡膜(通常是4μm),经过繁杂的程序,才能做成石蜡组织切片,即我们平时所说的白片,白片上带有手术或者穿刺取下来的组织。

视蜡块包含组织的大小,对蜡块进行简单的修整,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。 将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上,准备好切片用具后,开始切片。


▲ 脱水后的组织较脆,为了好切,切片机上方的雾化设备不断喷出水汽。


▲ 我切我切我切切切


▲ 切好的组织放进46摄氏度的水里,最容易展开。

然后贴在一个玻璃片(载玻片)上,放进60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的石蜡。这样就做成了石蜡组织切片,也就是白片啦。

大概流程也很清晰吧,就是:切片——摊片——烤片



三、最后说说HE染色切片

简单来说,给从蜡块上切下来的蜡片做HE染色,就是HE染色切片啦。


上面大家不是都看过了嘛,手术或穿刺取出的组织经过一系列步骤后被做成蜡块,切成很薄的切片,然后再经过贴片、烤片、脱蜡、水化、染色才能制成可以在显微镜下观查的切片,也就是HE染色切片,它是病理诊断的基本依据。

▲ 自动染色机

染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察。经过染色后,可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类型细胞组织。经过染色的切片保存时间长,需要病理会诊时便于携带。但是需要注意的是,如果要做免疫组化检査协助诊断,则需要白片(没有染色的切片)。

看到这,蜡块、白片和HE染色切片的关系你能看明白了吧,白片和HE染色切片都是从蜡块上切下来的。

嗯,说到免疫组化,那就多提几句吧。如果根据HE染色切片,病理医生仍不能确诊或是明确分期,帮助临床医生制定下一步治疗方案的时候,就要做免疫组化啦。

因为HE染色只是比较粗略地辨认不同细胞的形态学改变,比如我们常说的良性肿瘤和恶性肿瘤。而免疫组化是根据化学反应使标记抗体的显色剂显色,以此来确定组织细胞内的抗原,对其进行定位、定性及定量的研究,对于病理诊断中肿瘤的鉴别诊断、肺癌类型的判断,甚至对肺癌后续治疗都是十分有帮助的。此外,免疫组化可用于肺癌分子分型的判断,即运用免疫组化的方法进行基因检测。

免疫组化是在白片上直接进行的,切好的片子,加上对应的抗体,放进机器内,成片再提交给病理医生进行诊断。




说到这里,关于病理切片的整个流程已经非常清楚啦,见下图:


四、关于病理检测的常见问题

1、为什么病理报告出的那么慢?

如果你看完上文,应该已经知道一枚小小的病理切片的完工,需要经过N道严格的工序,而且大部分工作都是人工完成的。

不夸张的说,很多患者和家属等待病理科医生的“最终宣判”,当他们在病理报告上签上自己名字的一刹那,背后的工作量和压力都是无穷大的,所以真的急不来啊!

一般情况下,4 天左右能取到病理报告;如果是比较特殊的疾病,需要加做免疫组化、Fish 等进一步明确,这样就需要 7 天。

2、家人生病了本来就很着急,等病理报告的这段时间会耽误治疗吗?

家人们的这种心情可以理解。但是,患者的后续治疗要依据病理诊断,这就要求病理诊断的准确性和可靠性非常高。不管是普通病理诊断还是分子病理诊断,都有标准的检测流程,这套流程就是为了确保诊断结果的准确性。

要知道,病理诊断结果并不是病理医师加加班就可以提前1—2天出来的。而且这种“加速”的诊断结果,其准确性可能无法保证,因为前期工作稍有疏忽,就会导致病理诊断结果不准确。

所以,规范的操作流程,是保证结果准确的必要步骤,也是对病人负责。请大家耐心等待下吧,准确确诊才是开展正确治疗的前提嘛。

3、我想做病理会诊或基因检测,都需要提供什么呢?

一般会诊要求提供:

1.原病理报告单;
2.HE切片及免疫组化染色片;
3.白片10张或蜡块。

如果不能提供HE和免疫组化切片,请准备15张白片(基因检测的话差不多也就够啦)。各种材料的长相如下图:


好了,以上就是本篇专题帖对于蜡块、白片和HE染色切片的知识整理啦,不知道你这下弄明白了没?




参考资料:

《病理柳叶刀》,科普:病理科的宝藏—蜡块 https://mp.weixin.qq.com/s/-vfQUaM4lv9JmEJlfE4Fig
《淋巴瘤之家》,【淋巴瘤大讲堂】如何读懂淋巴瘤的病理诊断报告 https://mp.weixin.qq.com/s/GSDdJN3ZDkR4CFsQ1WmrNA
《大医生兵器谱》,“病理切片”出世记 https://mp.weixin.qq.com/s/padNT9ouNhsgoZBiIXAL6A
《肿瘤时间》,揭秘 | 病理报告为啥出那么慢?https://mp.weixin.qq.com/s/3NLxmLqwqhxr4BtkIfgzbg



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