弄个明白！免疫组化是什么意思？蜡块、白片和HE染色切片...

雨泽_a

首先声明，发这个帖并不是从科普、讲课的视角来说免疫组化的相关知识，毕竟我没那个能力。而是因为经常在群里看到家人们讨论相关话题，提及率还蛮高，想着就和大家一起从“不甚了解”的视角出发，收集整理些资料来学习了解下什么是免疫组化，蜡块、白片和HE染色切片有什么区别。

一、什么是免疫组化

免疫组化，即免疫组织化学检测，是病理诊断中一种常用的检测手段，主要应用免疫学抗原和抗体特异性结合的基本原理，对送检的标本进行切片、染色，再通过化学反应使标记抗体的显色剂显色，从而对组织细胞内的抗原（主要为蛋白质）进行定性、定位及相对定量研究。

免疫组化对于病理诊断中肿瘤的鉴别诊断、肺癌类型的判断，甚至对肺癌后续治疗都是十分有帮助的。

另外，免疫组化可用于肺癌分子分型的判断，即运用免疫组化的方法进行基因检测。

附专家科普视频：肺癌病理报告单上写的“免疫组化”是什么意思？后面的加减号代表什么？

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二、蜡块、白片和HE染色切片有什么区别

这块内容是我比较感兴趣的，因为确实平时听淋巴瘤之家服务中心的同事接病友电话时说的比较多（他们帮外地病友做病理会诊），搞不清楚这三者的区别，所以带着疑问去找的资料，按顺序一个个来说哈。

1.先说说蜡块

为什么先说蜡块呢，从上图可以看出，取下来的组织是“原料”（即标本，一般来说，病理诊断中的大标本是指手术切除后获取的标本，小标本则是指通过支气管或穿刺获取的活检标本），然后送到病理科严格按照取材要求进行取材，制作成蜡块，以便切成片状。






制作过程大致为：标本——脱水——透明——浸蜡——包埋。


▲ 这个家伙叫做脱水机，可以将病变组织里的水脱掉，这样石蜡才能融进去做标本


▲ 做蜡块的模子，把病变组织包埋在石蜡中


▲ 做好的蜡块，尺寸大概为3毫米厚，2厘米长，1厘米宽，为下一步的切片做准备

嗯，组织被包裹在石蜡中，以蜡块的形式进行保存，后续的病理诊断以及相应检测都需要借助这些蜡块来进行，这就是蜡块啦。


打个不恰当的比方，如果说蜡块是一小块羊肉（当然，这块肉特别特别小。。），那白片和HE染色切片都是由从这块羊肉上切下来的薄薄的肉片制成的。



2.再说说白片

蜡块做好了，下面就该切片啦（切片技师的小刀早已饥渴难耐。。）。

白片是指未经染色的石蜡组织切片，使用切片机从蜡块上切下来薄薄的一张蜡膜（通常是4μm），经过繁杂的程序，才能做成石蜡组织切片，即我们平时所说的白片，白片上带有手术或者穿刺取下来的组织。如果会诊单位要求借出白片，极有可能是加做免疫组化或者分子病理。

视蜡块包含组织的大小，对蜡块进行简单的修整，在组织边缘约0.1～0.2cm处，切去余蜡部分，否则易造成组织皱缩不平。 将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上，准备好切片用具后，开始切片。



▲ 脱水后的组织较脆，为了好切，切片机上方的雾化设备不断喷出水汽


▲ 我切我切我切切切


▲ 切好的组织放进46摄氏度的水里，最容易展开

然后贴在一个玻璃片（载玻片）上，放进60～65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15～30分钟，脱去溶化组织间隙的石蜡。这样就做成了石蜡组织切片，也就是白片啦。



大概流程也很清晰吧，就是：切片——摊片——烤片。




3.最后说说HE染色切片

简单来说，给从蜡块上切下来的蜡片做HE染色，就是HE染色切片啦，也是所说的常规病理。是将白片进行苏木精-伊红染色后制成的。经过HE染色，细胞核呈蓝色，细胞质呈红色，方便病理科医生进行形态学的观察。




上面大家不是都看过了嘛，手术或穿刺取出的组织经过一系列步骤后被做成蜡块，切成很薄的切片，然后再经过贴片、烤片、脱蜡、水化、染色才能制成可以在显微镜下观查的切片，也就是HE染色切片，它是病理诊断的基本依据。

染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察。经过染色后，可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类型细胞组织。经过染色的切片保存时间长，需要病理会诊时便于携带。但是需要注意的是，如果要做免疫组化检査协助诊断，则需要白片（上面白片部分有提到）。

看到这，蜡块、白片和HE染色切片的关系和区别大家应该都能明白了吧，白片和HE染色切片都是从蜡块上切下来的。如果根据HE染色切片，病理医生仍不能确诊或是明确分期，帮助临床医生制定下一步治疗方案的时候，就要做免疫组化啦。




因为HE染色只是比较粗略地辨认不同细胞的形态学改变，比如我们常说的良性肿瘤和恶性肿瘤。而免疫组化是根据化学反应使标记抗体的显色剂显色，以此来确定组织细胞内的抗原，对其进行定位、定性及定量的研究，对于病理诊断中肿瘤的鉴别诊断、肺癌类型的判断，甚至对肺癌后续治疗都是十分有帮助的。此外，免疫组化可用于肺癌分子分型的判断，即运用免疫组化的方法进行基因检测（开头说过，再重复一遍哈）。

免疫组化是在白片上直接进行的，切好的片子，加上对应的抗体，放进机器内，成片再提交给病理医生进行诊断。



以上，整理的有点凌乱，希望能对家人们有所帮助。

参考资料：

《病理柳叶刀》，科普：病理科的宝藏—蜡块 https://mp.weixin.qq.com/s/-vfQUaM4lv9JmEJlfE4Fig
《淋巴瘤之家》，【淋巴瘤大讲堂】如何读懂淋巴瘤的病理诊断报告 https://mp.weixin.qq.com/s/GSDdJN3ZDkR4CFsQ1WmrNA
《大医生兵器谱》，“病理切片”出世记 https://mp.weixin.qq.com/s/padNT9ouNhsgoZBiIXAL6A
《肿瘤时间》，揭秘 | 病理报告为啥出那么慢？https://mp.weixin.qq.com/s/3NLxmLqwqhxr4BtkIfgzbg
《内蒙古妇幼保健院》，什么是白片？什么是免疫组化？什么是HE切片？https://mp.weixin.qq.com/s/mPhsdzYE94WJEfJGlIqRow

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